t一 第29卷第3期2010年3月 种子(Seed) Vo1.29 No.3 Mar.2010 狭叶薰衣草种子萌发研究 黄珊珊,莫小路, 曾庆钱,刘瑶 (广东省中药研究所,广州510520) Study on the Germination of Lavandula angustifolia Mil1. HUANG Shan—shan,MO Xiao-lu,ZENG Qing-qian,LIU Yao 摘要:以狭叶薰衣草为实验材料,测定不同浸种时间、热激、钙 及EGTA等处理对其种子萌发率的影响。结果表明:狭叶薰衣 草种子以室温20 h清水浸种最为适宜;45℃热激在前期对种 子萌发具有一定的促进作用,但在后期对种子萌发有抑制作 用。低浓度的钙能促进种子萌发,并能缓和热激对种子萌发所 造成的影响,具有一定的保护作用。本研究为狭叶薰衣草的繁 殖与种植提供了参考。 关键词:狭叶薰衣草;种子萌发;热激;钙 中图分类号:S573 文献标志码:A 文章编号:1001—4705(2010)03-0078-04 狭叶薰衣草(Lavandula angustifolia Mil1.),又名 英国薰衣草,为唇形科薰衣草属多年生亚灌木,原产于 地中海西部大部分地区H J。2O世纪60年代我国开始 引种,现已在河南、陕西、新疆等地建立生产基地。薰 衣草是药用芳香植物,从鲜花中提取芳香油可以制造 香皂、花露水、清凉油等化工产品;还可以治疗神经性 心跳、气胀,具有镇静、驱风、缓解压力等功效;花可制 成花茶,此外,还适于庭院美化、花坛美化或盆栽,所以 具有很大的商业价值 j。 目前,薰衣草生产上多采用种子和扦插繁殖 。 种子繁殖简单易行,投资少,管理方便,植株寿命长,但 由于薰衣草种子小(千粒重为0.9~1.0 g),种皮角质 化且外包蜡质,发芽率极低;并且薰衣草种子具有休眠 现象,发芽极其缓慢 J。本试验旨在通过研究狭叶 薰衣草种子发芽的特性,找出最佳浸种时间,探讨钙及 热激对种子萌发的影响,以期为狭叶薰衣草优良品种 的繁殖和推广提供理论依据。 1材料与方法 1.1材料 2008年9月购于新疆伊犁的狭叶薰衣草种子。 收稿日期:2009—11—30 基金项目:广东省中药局课题(2009270)。 作者简介:黄珊珊(1981一),女,讲师,博士,主要研究方向为药用植物、 植物发育与细胞生物学等研究;E・mail:huangss@gdyzy.edu. cn。 ・78・ 1.2方法 1.2.1种子消毒 利用1%的高锰酸钾进行狭叶薰衣草种子消毒。 1.2.2种子萌发率的测定 种子均匀混合后,选取当年及去年的未经浸种的 种子各5O粒,均匀放在盛有湿润滤纸的培养皿中置于 25℃恒温培养箱中进行暗培养。48 h为间隔测其萌发 率,3次重复测平均值。 1.2.3不同浸种时间对种子萌发率的影响 选取饱满的当年种子,以清水进行1~24 h的浸 种,1~4 h间隔时间取样,每样50粒放在盛有湿润滤 纸的培养皿中置于25℃恒温培养箱中进行暗培养。 48 h为间隔测其萌发率。每处理3次重复。 1.2.4钙与EGTA对种子萌发的影响 选取饱满的当年种子,以10 mM的Cacl 和1O mM的EGTA溶液浸泡种子20 h。每样5O粒放在盛有 湿润滤纸的培养皿中置于25℃恒温培养箱中进行暗 培养。48 h为间隔测其萌发率。每处理3次重复。 1.2.5热激对种子萌发的影响 采用骤热升温方式,将盛有自来水的锥形瓶放入 水浴锅,调水浴温度至45℃,在保持20 min恒定后处 理实验材料。本实验分3组进行处理,每组处理100 粒种子,分别用蒸馏水、10 mM的CaCl:、10 mM的 EGTA溶液各浸泡20 h。具体操作如下:将100粒干 种子均分为两份,迅速倒人锥形瓶中,在45℃条件下 分别处理30 min和60 min。处理结束后,迅速将锥形 瓶中的热水倒掉,用室温自来水冲洗种子5次以终止 热激处理。以未处理的5O粒种子为对照。处理后的 种子放在盛有湿润滤纸的培养皿中置于25℃恒温培 养箱中进行暗培养,48 h为间隔测其萌发率。本实验 共重复3次,以下结果均为平均值 。 2结果与分析 2.1种子萌发率的测定 狭叶薰衣草发芽率不高,存在许多干瘪种子。种 问题探讨 ^ v斟赫搏 黄珊珊等:狭叶薰衣草种子萌发研究 子自浸种之13开始直至4天后开始有种粒萌发,约再 ∞ ∞ ∞ {寻 伯 0 经8天后种子才停止萌发。试验结果表明,当年种子 的萌发率为45%,去年种子的萌发率为40%,从图I 后,种子萌发率最高,达78%;而经10 mM EGTA浸泡 ∞∞ ∞的加∞加 O 的种子热激60 min后,种子萌发率最低,仅为2%。除 去EGTA处理的种子,经蒸馏水浸泡的种子热激60 可知,当年种子的发芽势也略高于去年种子。 2 4 6 8 10 12 14 萌发天数(d) 图1 狭叶薰衣草种子的发芽势 2.2不同浸种时间对种子萌发率的影响 不同浸种时间对狭叶薰衣草种子发芽有一定的影 响,一般随着浸种时间的延长,种子发芽力(发芽势及 发芽率)逐渐增加,20 h发芽率达最大值,为93.3%。∞∞∞ ∞∞∞∞加 0 浸种时间超过20 h,发芽力趋于平稳,之后呈下降趋势 (见图2)。可见狭叶薰衣草种子的浸种时间以室温 20 h为最适宜。 §}} 羝 2 4 6 8 1O 12 14 荫发天数(d】 图2不同浸种时间对狭叶薰衣草种子发芽率的影响 2.3钙与EGTA对种子萌发的影响 经10 mM的CaC1:溶液浸泡的种子萌发率达 88%,高于经蒸馏水浸泡的种子萌发率(84%),而经 10 mM的EGTA浸泡的种子,其萌发受到显著的抑制, 萌发率仅为12%(图3)。说明一定浓度的钙浸泡对 种子萌发有明显的促进作用,并能提高种子的萌发率, 钙的缺乏将抑制种子萌发。 2.4热激对种子萌发的影响 45℃下,热激60 arin后的种子萌发率低于热激30 min后的种子萌发率,而在前期热激60 min的发芽势 高于相应处理热激30 min后的发芽势(图4)。说明较 长时间的热激在前期对种子萌发有一定的促进作用, 但在后期对种子萌发有明显的作用。 由图4可知,经10 mM钙浸泡的种子热激30 min min后的萌发率低于其它3种处理,萌发率为52%。 此外,经钙浸泡的种子热激后,其前期发芽势较缓,但 在后期发芽率最高。说明在一定时间的热激条件下, 钙处理对种子有一定的保护作用,除去钙离子,种子萌 发率几乎为零。 ^ V 褂 状 鲁ls 2 4 6 8 10 12 14 萌发天数(d) 图3钙与EGTA对狭叶薰衣草种子萌发率的影响 吾;∞ ∞∞柏∞加 O ^ V 瓣 抵 划 1 2 4 6 7 8 9 10 11 14 15 16 18 荫发天数(d) 图4热激对种子萌发的影响 3讨论 一定时间的浸种对种子的发芽率及发芽势都有影 响"]。浸种时间过短,将导致种子吸水不足,胚内的 蛋白质、酶等大分子和细胞器活化速度降低,因而不利 于种子发芽;浸种时间过长,将导致种子出现无氧发酵 现象,因而影响种子的发芽率【8]。有研究表明,在水 稻不同类型品种间,达到最佳发芽率所需的浸种时间 也不同,浸种时间过短或过长均不利于种子发芽 。 辣椒各品种均以浸种2—3 h最为适宜l9』,黑豆种子的 最佳浸种时间为8 h[1引。在本研究中,狭叶薰衣草浸 种时间以室温20 h为最适宜。植物在种与品种之间 的吸水率、吸水速度,以及达到正常发芽所需的种子吸 水率都存在明显差异 挖],使得不同种与品种间达到 正常发芽率的浸种时间也存在差异。因此,农业生产 上,要根据品种的特性,确定适宜的浸种时间,从而达 到最佳的产值及经济效益。 ・79・ 第29卷第3期2010年3月 种子(Seed) Vo1.29 No.3 Mar.2010 热激反应是普遍存在的一种生物学现象,是生物 源Ca在逆境胁迫下的作用机理,前人推测可能是因 适应环境的一种自我保护作用H引。热激处理能提高 黄瓜种子的萌发率,但推迟萌发进程 。在小麦的相 关研究中,未经浸泡处理的小麦种子,短时间(30 min) 的热激处理能抑制发芽,而较长时间(60 min)的热激 处理则能促进发芽。浸泡过的种子,短时间热处理对 为Ca在稳定细胞结构方面发挥了作用 。但是,关 于外源Ca在逆境下的作用机理尚缺乏细胞化学的直 接证据。植物细胞钙信号系统是一个引人注目的研究 领域,与动物细胞相比,钙信使的传递与产生的生理效 应之间的关系的研究还很缺乏。钙离子如何提高种子 生活力以及其对种子萌发在逆境中的保护作用的机 其有促进作用,而较长时间的热刺激能促进根生长,阻 碍苗的生长 J。在本研究中,较长时间的热激(60 min)在前期对种子萌发有一定的促进作用,但在后期 则表现明显的作用。笔者推测,热激诱发机体产生热 激响应,种子经短时间的热激处理能产生热激响应和 相应的保护机制L6】,促进机体产生新的蛋白质,如热 激蛋白等(heat shock protein,HSP),在细胞受到热胁 迫时对保护细胞起着重要作用¨ ,因此,种子萌发率 基本不受影响。但随着时间的推移,长时间的热处理 破坏了植物本身出现的保护响应,可能是由于热激时 间过长,诱导一些新基因表达造成的,具体原因还有待 进一步分析研究。 钙离子是植物生长发育所必需的元素之一,调节 植物生长发育的各个方面 。低浓度的钙溶液(5— 10 mmol/L)对种子萌发有一定的促进作用,最适浓度 为10 mM,但是,高浓度的ca溶液(大于10 mmol/L) 以及缺钙对种子萌发具有明显的抑制作用 卜 J。段 咏新等¨副研究发现,低浓度的Ca处理可提高黄皮种 子萌发过程中的淀粉酶的活性;洪法水等。加 证实了钙 处理可提高玉米种子萌发过程中淀粉酶、脂肪酶、谷丙 转氨酶的活性,从而提高种子活力,促进幼苗生长。周 敏和徐小蓉u 在研究益母草种子萌发时发现,高浓度 的钙显著抑制了益母草种子的发芽率、发芽指数、活力 指数以及幼苗鲜重的增加等。EGTA和EDTA处理都 能降低种子活力【1’],说明钙在种子萌发过程中是必需 的。本实验结果表明:低浓度的钙处理在一定程度上 提高了狭叶薰衣草的发芽势,对狭叶薰衣草的萌发有 一定的促进作用,与前人的研究相报道一致。使用 CaCI:溶液浸种不但价廉物美,而且操作简单,不失为 一种促进狭叶薰衣草种子发芽的有效方法。关于钙处 理对狭叶薰衣草种子发芽过程中酶活性的影响及作用 机理有待进一步研究。 生理学研究发现,外施钙可以增强植物对许多非 生物逆境的适应性,减轻逆境对植物所造成的伤 害 卜圳。Gong等 以玉米为材料,用钙处理后可以 增强玉米幼苗的耐热性。本研究结果表明,在一定时 间的热激条件下,钙处理对种子萌发具有一定的保护 作用,除去钙离子,种子萌发将受到严重影响。关于外 ・80・ 理,还有待进一步深入研究。 参考文献: [1]吴征镒.中国植物志[M].北京:科学出版社,1977,65(2): 248. [2]黄珊珊,廖景平.狭叶薰衣草与羽叶薰衣草核型分析[J].园 艺学报,2007,34(3):735—738. [3]郑兴国,陆中元,陈建香,等.薰衣草繁殖技术[J].新疆农业 科技,2005,(2):45—46. [4]姚悦梅.GA 浸种对薰衣草种子萌发及幼苗生殖的影响 [J].种子科技,2005,(6):343—344. [5]张瑞麟,李志宏,范敏,等.不同处理对薰衣草种子萌发和扦 插生根的影响[J].新疆农业大学学报,2007,30(2):54— 56. [6]伊江梅,张飞雄.热激对小麦种子萌发和若干生理形状的影 响[J].首都师范大学学报,2003,24(2):57—9. [7]侯志兵,赵祥,白志明,等.不同浸种时间对达乌里胡枝子种 子发芽力的影nlf EJ].草原与草坪,2007,124:11—14 [8]钱春荣,王俊河,冯延江,等.不同浸种时间对水稻种子发芽 势和发芽率的影响[J].中国农学通报,2008,24(9):183— 85. [9]李颖,王恒明.不同浸种时间对辣椒种子发芽的影响[J].上 海蔬菜,2003(1):23—24. [10 3杨和连,周成.浸种时间对黑豆种子发芽力的影响[J].广 西园艺,2005,16(1):7—11. [11]汪晓峰,丛滋金.种子活力的生物学基础及提高和保持种 子活力的研究进展[J].种子,1997,16(6):36—39. [12]张玉屏,朱德峰.浸种时间和温度对不同类型水稻品种种 子吸水与萌发的影响[J].中国农学,2002,18(5):25—26. [13]张孔恬,李京京.雄性不育高粱线粒体与细胞核对热激反 应及其与育性关系的研究[J].遗传学报,1991,5:469— 472. [14]钟华鑫.热激处理对黄瓜种子萌发及离体培养子叶直接分 化花芽的影响.植物生理学通讯,1993,2:98—100. [15]苗琛,利容千,王建波.甘蓝热胁迫叶片细胞超微结构研究 [J].植物学报,1994,36(9):730—732. [16]BUSH,D.S.Calcium regulation in plant cells and its role in signaling[J].Annul Review of Plnat Physiology.1995,46: 95—122. (下转第83页) 问题探讨 麻云翠等:不同处理对火棘种子萌发的影响 1974:180. 3讨论与结论 植物种子的萌发受物种本身生物学特性和环境因 子综合作用的影响。一般认为,温度、水分和光照是调 控植物种子萌发的主要生态因子¨l1 J。本实验中,火 棘种子在处理后的3—5内即可萌发,并在30 d内结 [2]王敬勉,廖德胜,栗巧功.火棘果营养成分及果胶的研究 [J].食品科学,1992,13(4):40—42. [3]唐克华,寻勇,丁文,等.湘西北火棘籽油脂含量及其与土壤 养分的关系[J].应用生态学报,2007,18(8):1 903—1 907. [4]蒋利华,熊远福,李霞,等.野生火棘果有效成分研究进展 [J].中国野生植物源,2007,26(2):7—9. [5]高见.火棘引种栽培适应性试验[J].东北林业大学学报, 2009,37(1):18—20. 束萌发,按照Baskin等 对种子休眠的定义,火棘种 子没有休眠,这与其他蔷薇科植物由于具有休眠而延 长种子萌发的情况不同 .15J,不同温度对种子萌发的 影响表明:种子在l5—25℃温度范围之间萌发率较高 (82.50%),而高温(>30 oC)明显降低种子萌发率; 当温度达到35℃时,种子萌发率仅为23.75%,故推 测温度可能是影响该物种资源分布的重要生态因子。 火棘种子在12 h/d和全黑暗(0 h/d)条件下,种子萌 [6]侯建军,魏文科,薛慧,等.野生植物火棘的研究进展[J].湖 北民族学院学报:自然科学版,2002,20(1):15—18. [7]宋松泉,程红焱,龙春林.种子生物学研究指南[M].北京: 科学出版社,2oo5(3):25—61. [8]周元,孙卫邦,李从仁.三棱栎种子萌发特性初探[J].武汉 植物学研究,2003,21(1):73—76. 发率可达76.25%,而24 h/d光照处理明显降低了种 子萌发率。Kyereh等¨ 认为,光照可能引起温度升高 而导致种子含水量下降,从而影响种子萌发。故本实 验中不同光照处理下种子萌发与温度处理结果是一致 的;PEG渗透调节可以控制种子水合状态,调节种子 的萌发行为¨ 。在本实验中,24 h和48 h的PEG浸 种处理对火棘种子萌发均有较强抑制作用,表明PEG [9]柴胜丰,蒋运生,韦记青,等.槐树种子萌发特性研究[J].种 子,2008,27(6):43—46. [1O]李玉奇,邓光华.观赏植物火棘研究进展[J].江西林业科 技,2005(1):39—40. [11]Baskin C C,Basking J M.Germination ecophysiology of herba・ ceoLIs plant species in a temperature region[J].American Journal of Botany,1988,75:286—305. 浸种对种子正常吸水后其生理结构的变化产生了抑制 作用,故火棘种子在萌发期间对干旱胁迫较敏感。 [123申仕康,王跃华.乡土树种茶梨种子萌发特性及其对人工 繁育的启示[J].生态学杂志,2009,28(11):2 165—2 170. [13]Baskin JM,Baskin CC.A classification of seed dormancy [J].seed Science Research,2004,14:1—16. 研究结果表明,火棘种子萌发最适应温度为ls~ 25℃之间,12 h适宜的光照处理可促进种子的萌发, PEG渗透胁迫处理降低了种子萌发率,火棘种子萌发 期对干旱较敏感。故通过种子萌发进行火棘人工繁育 时,应考虑不同生态因子对种子萌发的影响,提高该物 种人工繁育的成功率,从而促进其种质资源的有效开 发利用。 [14]顾增辉,张治明,曹亚玲.五种野生枸子的休眠与快速萌发 [J].植物生理学通讯,1993(4):253—256. [15]王贵元,孙茜.不同层积时间和赤霉素处理对桃种子萌发 的影响[J].种子,2009,28(1):90—92. [16]Kyereh,B,Swaine MD,Thompson J.Effect oflight on the ger- minafion of forest trees in Ghana[J].Journal of Ecology, 1999.87:772—783. 参考文献: [1]俞德浚.中国植物志,第36卷[M].北京:科学出版社, [17]宋松泉,程红焱,姜孝成,等.种子生物学[M].北京:科学 出版社,2008:95—164. (上接第80页) [17]宋松泉,陈健,傅家瑞.钙提高玉米种子活力的作用[J].热 带亚热带植物学报,1995.3(4):56—60. [22]袁清昌,许长成,邹琦.钙信使系统在百草枯诱导小麦幼苗 膜脂过氧化中的作用[J].植物生理学通讯,1996,32(1): l3—16. [18]段咏新,宋松泉,傅家瑞.钙在黄皮种子萌发中的作用[J]. 种子,1997,2:4—6. [23]卢少云,黎用朝,郭振飞,等.钙提高水稻幼苗抗旱性的研 究[J].1999,中国水稻科学,13(3):161—164. [24]GongM.LiY J,Dai x,TinM,aLi ZG.Involvement of calcium and ealmedulin in the acquisiiton of heat shock induced ther- [19]周敏,徐小蓉.不同钙源浸种对益母草种子萌发的影响 [J].科技咨询导报,2007,13:254—256. [20]洪发水,马成昌,王旭明,等.钙和锌对玉米种子活力和萌 motolernee ain maize seedlings[J].Journal f oplant physiolo- gY,1997,150:615—621. 发过程中酶活性的影响[J].植物生理学通讯,1996.32 (2):110—112. [25]李美茹,刘鸿先,王以柔,等.钙对水稻幼苗抗冷性的影响 [J].植物生理学报,1996,22:379—384. 83・ [21]赵可夫,卢元芳,张宝泽,等.ca对小麦幼苗降低盐害效应 的研究[J].植物学报,1993,35(1):51—56. ・