联合检测血清afp-l3和dcp在肝细胞癌中的应用

邹珍珍

高致远

童林

方欣

检验科（上海

200438）

上海东方肝胆外科医院

（AFP-L3）（DCP）揖摘要铱探讨联合检测血清甲胎蛋白异质体和脱γ-羧基凝血酶原水平在肝细胞癌（HCC）中的应用价值。收集HCC患者285例、良性肝病患者259例及同期健康体检者235例。用亲和吸附离心柱法洗脱分离AFP-L3、电化学发光法测定AFP和洗脱AFP-L3，计算AFP-L3占总AFP的百（AFP-L3%）分比，用化学发光分析方法定量检测各组血清DCP。并对血清AFP-L3、DCP水平进行统计学分析。HCC组的AFP-L3、DCP水平均高于健康对照组和良性肝病组，差异有统计学意义（<0.05）。AFP高浓度组中两指标水平高于低浓度组，低浓度组中两指标水平高于阴性组，差异有统计学意义。两指标单独检测HCC时，DCP的敏感度较高，AFP-L3的特异度较高。两者并联检测时，约登（<0.05）两者联合检指数最高，诊断效能最优。血清AFP-L3、DCP联合检测对HCC患者具有较强的诊断效能，减少漏检率。测可提高HCC的早期检出率，揖关键词铱肝细胞癌甲胎蛋白甲胎蛋白异质体-3脱γ-羧基凝血酶原诊断效能揖中图分类号铱R735.7揖文献标识码铱Bdoi:10.3969/j.issn.1009-9905.2019.09.019揖文章编号铱1009-9905（2019）09-0735-03肝细胞癌渊hepatocellularcarcinoma袁HCC冤是病

死率较高的恶性肿瘤之一咱1暂袁通常由于诊断较晚而预后很差袁所以HCC的早期诊断尤为重要咱2暂遥甲胎蛋白渊alphafetoprotein袁AFP冤是临床上HCC早期诊断和治疗观察的重要指标袁但30%~40%的漏检率仍不能满足临床需求咱3暂遥近些年袁甲胎蛋白异质体渊alphafetoprotein-L3袁AFP-L3冤和脱酌-羧基凝血酶原渊des-gammacarboxyprothrombin袁DCP冤作为辅助诊断HCC的新型肿瘤标志物相继出现遥为了探讨AFP-L3尧DCP联合检测在HCC诊断中的价值袁提高早期检出率袁本研究分析了HCC中2种血清指标水平尧阳性率及两者单独和联合检测的诊断效能袁报道如下遥

1资料与方法

1.1一般资料收集2017年4要10月袁上海东方肝胆外科医院住院的HCC患者共285例袁经临床体征尧影像学及病理确诊袁根据AFP水平分为3个

标正常袁并排除全身其他疾病袁其中男123例袁女102例袁中位年龄48渊38耀55冤岁遥各组年龄和性别比等比较袁差异无统计学意义袁具有可比性渊跃0.05冤遥患者均未服用维生素K及维生素K拮抗剂类药物尧NMTT头孢类抗生素袁排除梗阻性黄疸等疾病遥

1.2仪器与试剂DCP检测采用LumipulseG1200

亚组袁AFP阴性组院血清AFP水平约20ng/mL袁其中男67例袁女52例袁中位年龄53渊46耀62冤岁曰AFP低浓度组院血清AFP水平为20耀400ng/mL袁其中男50例袁女35例袁中位年龄55渊46耀61冤岁曰AFP高浓度组院血清AFP水平跃400ng/mL袁其中男45例袁女36例袁中位年龄53渊41耀60冤岁遥另收集同期确诊的良性肝病患者259例渊良性肝病组冤院经本院影像学及血清学联合检验袁结合临床体征等确诊袁包括慢性肝炎89例袁肝硬化85例袁肝血管瘤85例袁其中男154例袁女105例袁中位年龄46渊38耀50冤岁遥健康对照组225例袁为同期本院健康体检者袁查体尧B超各项指

咱作者简介暂邹珍珍渊1990-09~冤袁女袁江苏苏州人袁研究方向院临床免疫学检验学遥E-mail:zouzhen0922@sina.com

中国现代普通外科进展2019年9月第22卷第9期736

化学发光免疫分析仪检测袁仪器与配套试剂均由日本富士瑞必欧公司提供曰AFP-L3由北京热景公司生产的亲和吸附离心柱分离袁AFP和洗脱的AFP-L3使用德国罗氏Cobase601型全自动电化学发光免疫分析仪及罗氏配套试剂进行检测袁根据北京热景试剂说明书操作袁其中AFP-L3占总AFP的百分比渊AFP-L3%冤=[渊处理后标本AFP-L3含量伊2.5冤/处理前标本AFP含量]遥

1.3标本采集与检测采集各组受试者清晨空腹

串联检测为两指标同时阳性即为阳性袁AFP-L3与DCP并联检测为两指标满足任意一个指标为阳性时即为阳性遥

1.4统计学处理采用SPSS17.0软件袁相关数据采用Kolmogorov-Smirnov渊K-S冤进行正态性检验袁各组间AFP-L3尧DCP数据用中位数渊四分位数冤表示曰多组间比较采用非参数Kruskal-Wallis检验曰组间两两比较采用Mann-Whitney检验曰计数资料比较采用字2检验袁多样本利用检验曰约0.05表示差异有统计学意义遥2结果

2.1各组间血清AFP-L3尧DCP水平通过K-S检验袁除AFP-L3为非正态分布袁其余各组检测项目均为正态分布遥HCC组血清AFP-L3尧DCP水平高于健康对照组尧良性肝病组袁差异均有统计学意义渊约0.05冤曰在HCC组中袁AFP低浓度组血清AFP-L3尧DCP水平高于AFP阴性组袁AFP高浓度组血清AFP-L3尧DCP水平高于AFP低浓度组袁差异均有统计学意义渊约0.05袁表1冤遥

DCP渊mAU/mL冤15.35渊11.18~18.68冤20.54渊15.25~21.00冤1914.5a渊30.00~4821.33冤730.25b渊27.00~2017.28冤1696.5c渊48.20~4014.0冤4667.5渊58.00~9001.65冤静脉血3mL袁室温静置15耀30min后以3000r/min离心10min袁4h内完成血清AFP-L3测定袁其余血清分装袁-20益冰箱保存待测血清DCP遥本研究分别以10%尧40mAU/mL尧20ng/mL作为AFP-L3%尧DCP尧AFP诊断PHC的临界值袁当检测结果显示处理后标本中AFP-L3含量<1ng/mL时袁无需计算AFP-L3%袁直接判定为阴性结果渊AFP-L3%=0冤曰当检测结果显示处理后标本中AFP-L3逸400ng/mL时袁即待测标本中AFP-L3含量逸1000ng/mL袁可判定为阳性结果渊AFP-L3%逸10.1%冤遥AFP-L3与DCP

表1各组血清AFP尧AFP-L3%尧DCP水平比较[M渊P25-P75冤]组别例数AFP渊ng/mL冤AFP-L3%健康对照组2253.25渊1.80~3.58冤2.03渊0.00~4.11冤良性肝病组2593.00渊1.70~3.65冤3.68渊0.00~5.33冤aHCC组285441.08渊3.48~1189.32冤11.55a渊2.42~23.24冤AFP阴性组1195.16b渊2.13~7.25冤4.62b渊0.00~6.28冤AFP低浓度组85131.24c渊39.40~197.80冤15.22c渊3.00~28.35冤AFP高浓度组812957.84渊930.35~4886.0冤25.09渊9.25~37.60冤a院与健康对照组尧良性肝病组比较约0.05曰b院与AFP低浓度组比较约0.05曰c院与AFP高浓度组比较约0.052.2HCC组间血清AFP-L3尧DCP阳性率在AFP阴性水平的HCC组中袁AFP-L3尧DCP的检出率分别是10.08%尧74.79%袁随AFP浓度的升高两指标检出率均升高袁其中AFP-L3在3组中检出率的差异有统计学意义渊约0.05冤曰而DCP的阳性率在3组中差异无统计学意义渊跃0.05冤曰各组中的DCP的阳性率较AFP-L3高渊表2冤遥表2不同AFP浓度组间AFP-L3尧DCP的阳性率的比较例数表3血清AFP-L3%与DCP单独尧敏感度58.2440.7077.8934.3984.21特异度96.29100.097.78100.097.78约登指数54.5340.7075.6734.3981.99联合检测PHC的诊断效能渊%冤检测项目AFPAFP-L3DCPAFP-L3与DCP串联AFP-L3与DCP并联3讨论自AFP发现并应用于临床后袁AFP在HCC的诊断中一直发挥着重要的作用遥随着人们对肿瘤标志物的进一步研究及大量临床回顾性分析显示袁AFP在HCC的诊断时仍有30%耀40%的漏诊率遥有研究报道袁部分慢性肝炎尧肝硬化等良性肝病会使AFP有不同程度的升高袁低分化的HCC患者尚不会出现血清AFP水平的升高咱4暂袁所以单纯以AFP作为HCC的诊断指标袁则会导致疾病的误诊尧患者病情延误等遥

近些年出现较多肿瘤标志物DKK尧microRNA等袁因检测方法学标准化有待完善袁相关机制研究不足等因素尚不能服务于临床遥AFP-L3是AFP中

2.3各组间AFP-L3尧DCP单独及联合检测HCC的诊断效能以健康对照组为对照袁两指标单独检测时袁AFP-L3的特异度优于AFP袁血清DCP的敏感度优于AFP曰两者串联检测时袁敏感度降低袁但特异度较高曰两者并联检测时袁敏感度尧约登指数高于AFP-L3尧DCP单独检测渊表3冤遥

AFP-L3阳性DCP阳性例数率渊%冤例数率渊%冤AFP阴性组1191210.088974.79aAFP低浓度组854451.766576.47bAFP高浓度组816074.076883.95a院与AFP阴性组比较袁约0.05曰b与AFP低浓度组比较约0.05组别邹珍珍袁等.联合检测血清AFP-L3和DCP在肝细胞癌中的应用与肝癌相关的3种异质体之一袁与肝癌的发生发展有较好的相关性咱5暂对PSA植免疫冤物袁其检测方式主要是先利用AFP学方结凝合集法进能力素渊行的如定不LCA量检测同进尧刀性豆袁异素临床质ConA体上分主要应用的是离或豌豆凝后集应用素咱6暂袁然推荐方法要要要亲和吸附离心管法遥血清AFP-L3目前已被中国卫生部推荐为HCC诊断特异性指标咱7暂HCC患者尧早慢期性诊断丙肝中袁在患者袁AFP-L3和肝硬可以化患者辅助等筛高查危慢人性群乙中肝直径约2cm的HCC遥HCC患者AFP-L3阳性常提示肿瘤生长速度较快且可能发生早期转移咱8暂单独检测血清AFP-L3用于HCC的诊断遥本时研究中袁虽敏感袁度仅为40.70%袁但特异度为100%遥1984年DCP首次以肿瘤指标被提出袁新型的肝癌标志物DCP具有良好的敏感度和特异度袁目前已有化学发光方法学的成品检测试剂盒上市遥在日本和美国袁DCP已被作为常规诊断HCC的新型指标袁本研究结果显示血清DCP诊断HCC的敏感度尧特异度和约登指数均高于AFP袁与文献报道咱9-10暂相符遥

DCP本研究结果显示袁AFP高浓度组血清AFP-L3AFP-L3水平AFPAFP-L3浓度尧DCP高于升高水平低浓袁AFP-L3高于度组尧阴渊约0.05冤袁低浓度组血清尧DCP性组均渊约0.05冤遥且随着着AFP尧浓DCP度升在高HCC袁AFP-L3诊断尧中DCP有一呈的定上检的临床升趋势袁提示出率也意义呈上遥随升趋51.76%势袁AFP-L3在3组的检出率分别为10.08%AFP-L3尧74.07%异度最高与袁提HCC袁差异有统计学意义渊约0.05冤袁提示尧示对的疾疾病的发生发展病进展有关袁且单独及预后检测随访时有特较

好74.79%的临床意义遥DCP在3组0.05L3冤袁提尧76.47%示DCP尧与83.95%AFP袁相关差异性小无的遥统检以计学出率上提意义分别为示渊跃的尧DCP可提高HCC早期检出率袁减少因AFPAFP-阴性AFP漏两者袁检袁且单独检测DCP的敏感度尧特异度均高于串提联示检测DCP时的特诊断异度效最高能优袁于并AFP联检测遥AFP-L3时敏感尧DCP度尧准确度最高遥

本研究不足之处在于袁AFP-L3的检测方法中需进行手工操作袁其批内尧批间均存在一定变异袁且由于仪器灵敏度的限制袁在AFP浓度低于10ng/mL时AFP-L3袁难以测检测试剂划为定识别阴AFP-L3%DCP性组袁本研究直接将此类患者的保守别遥区应用的DCP9耀10诊断个氨HCC基酸时残袁基因袁尚无法鉴别是否为服用维生素K拮抗剂等药物所致遥所以研究对象应排除此类患者咱8暂综上所述袁在诊断HCC的实验室遥

指标中袁单项检测AFP其诊断作AFP-L3为的特异度最高袁DCP的敏感度最高袁由效筛能袁选弥指标补单项袁联检测合检测的不AFP-L3足遥

尧DCP可提高参

考

文

献

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渊收稿日期院2018-12-29冤

渊本文编辑院周立波曰技术编辑院孔晖冤